人類一直不斷地深入對(duì)細(xì)胞的了解，同時(shí)致力于在體外培養(yǎng)細(xì)胞。但人體內(nèi)有幾十萬(wàn)億的細(xì)胞，為什么還要在體外培養(yǎng)呢？
專家解釋說(shuō)，當(dāng)人體內(nèi)器官或組織發(fā)生病變時(shí)，可在體外培養(yǎng)相關(guān)細(xì)胞，并輸入人體內(nèi)對(duì)病變部位進(jìn)行“修補(bǔ)”；新藥問(wèn)世之前必須先在實(shí)驗(yàn)室里證明其可靠性，需要用培養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)藥物進(jìn)行檢測(cè)。
作為一項(xiàng)在生命科學(xué)領(lǐng)域中長(zhǎng)期使用的技術(shù)，細(xì)胞培養(yǎng)能讓研究人員在體外研究細(xì)胞的生理和病理。然而，隨著對(duì)細(xì)胞微環(huán)境的逐漸了解，研究人員希望能在實(shí)驗(yàn)室里為細(xì)胞提供與體內(nèi)環(huán)境更近似的培養(yǎng)環(huán)境，從而獲得更真實(shí)、準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。于是，3D細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)蓬勃發(fā)展起來(lái)。
三維空間能更好模擬細(xì)胞生長(zhǎng)的微環(huán)境
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)即模擬體內(nèi)微環(huán)境，在無(wú)菌條件下，為細(xì)胞提供適當(dāng)?shù)臏囟?、酸堿度以及細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖所需的營(yíng)養(yǎng)，使其能在體外維持生長(zhǎng)繁殖并保持其結(jié)構(gòu)、功能的技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用十分廣泛，可以應(yīng)用在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究、抗體制備、新藥篩選、基因工程等。
細(xì)胞增殖、分化和代謝等生理活動(dòng)都會(huì)受到微環(huán)境的嚴(yán)重影響。清華大學(xué)醫(yī)學(xué)院教授杜亞楠說(shuō)，傳統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)方式面臨諸多困難，比如需要依賴人工一步一步將細(xì)胞“種植”在培養(yǎng)皿上，而一個(gè)傳統(tǒng)的二維平面培養(yǎng)皿所能培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量從百萬(wàn)到千萬(wàn)個(gè)不等，但這最多只能滿足一位患者治療所需。杜亞楠認(rèn)為，傳統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)方式培養(yǎng)效率有限，這將導(dǎo)致細(xì)胞治療的效率難以提升，無(wú)法真正惠及大眾。
傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)方式所用的材料和工具使得細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中的質(zhì)量、功能難以保持穩(wěn)定。杜亞楠說(shuō)，細(xì)胞培養(yǎng)皿一般是由硬塑料制成，跟細(xì)胞原本的生長(zhǎng)環(huán)境相差甚遠(yuǎn)。細(xì)胞和人一樣，只有給它們提供接近原生的培養(yǎng)環(huán)境，它們才能夠?qū)崿F(xiàn)快速、高質(zhì)量的繁殖?！按蟛糠旨?xì)胞的生長(zhǎng)環(huán)境是很柔軟的，將其直接放在硬質(zhì)的培養(yǎng)皿里培養(yǎng)，存活數(shù)量、功能都有可能出現(xiàn)問(wèn)題。”杜亞楠說(shuō)。
浙江大學(xué)教授賀永也表示，傳統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)并不能完全呈現(xiàn)機(jī)體組織內(nèi)的微環(huán)境，所培養(yǎng)細(xì)胞的生理狀態(tài)和活性與體內(nèi)細(xì)胞并不完全一致，其結(jié)果往往與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床實(shí)驗(yàn)結(jié)果有出入。
3D細(xì)胞培養(yǎng)是指細(xì)胞可以在人工創(chuàng)造的三維空間結(jié)構(gòu)中遷移、生長(zhǎng)，而三維空間能更好地模擬生物體內(nèi)細(xì)胞存活的自然微環(huán)境，可以保持細(xì)胞間相互作用以及更逼真的生化、生理反應(yīng)。
多種3D細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)不斷涌現(xiàn)
目前，3D細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)主要分為無(wú)支架和基于支架的3D細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)兩大類。
無(wú)支架的3D細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是根據(jù)細(xì)胞易于聚集的自然特性，使細(xì)胞聚集成微球并保持三維構(gòu)型進(jìn)行培養(yǎng)，常見的有懸滴法、旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)法和磁力懸浮法等。
由于支架在3D細(xì)胞培養(yǎng)中具有結(jié)構(gòu)剛性等優(yōu)勢(shì)，因此研究人員紛紛把目光轉(zhuǎn)向了基于支架的3D細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，比如杜亞楠團(tuán)隊(duì)研發(fā)的3D TableTrix微載片取代了傳統(tǒng)的二維平面培養(yǎng)皿，成為細(xì)胞培養(yǎng)的新載體。該微載片可降解，不需要復(fù)雜繁瑣的人工操作便可與細(xì)胞懸液一起直接投放到智能化生物反應(yīng)器中。隨后，微載片遇水便可分散成數(shù)萬(wàn)個(gè)球狀顆粒，顆粒表面上密密麻麻分布著眾多孔隙，每個(gè)孔隙都可進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，細(xì)胞培養(yǎng)數(shù)量較傳統(tǒng)方式呈指數(shù)級(jí)增長(zhǎng)。而每個(gè)球狀顆粒的直徑均可在50到500微米之間進(jìn)行自主調(diào)節(jié)，實(shí)現(xiàn)了針對(duì)不同尺寸細(xì)胞的定制化培養(yǎng)。
除微載片外，研究人員還引入了基于水凝膠的培養(yǎng)基質(zhì)系統(tǒng)。水凝膠是一種有效的3D細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)，由天然或合成蛋白質(zhì)分子網(wǎng)絡(luò)等組成，由于存在大量的水，水凝膠的生物物理特性與天然組織的生物物理特性非常相似，能為細(xì)胞生長(zhǎng)提供良好的環(huán)境。
賀永說(shuō)，3D細(xì)胞培養(yǎng)還面臨一些困難和挑戰(zhàn)，比如標(biāo)準(zhǔn)化，標(biāo)準(zhǔn)化的設(shè)備和操作程序使不同研究人員生成的數(shù)據(jù)具有可比性。但目前，不同實(shí)驗(yàn)室建立的3D細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的培養(yǎng)設(shè)備和樣品缺乏統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)難以對(duì)比。因此，建立模塊化培養(yǎng)系統(tǒng)、簡(jiǎn)化培養(yǎng)操作、降低培養(yǎng)成本是實(shí)現(xiàn)3D細(xì)胞培養(yǎng)需要解決的問(wèn)題。
